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淀粉水解糖的制备
一实验目的:
(1)通过实验,了解淀粉糊化及酶法制备淀粉糖浆的基本原理;
(2)掌握淀粉酶解法制备淀粉糖浆的实验方法,
(3)熟悉淀粉水解产品的葡萄糖值测定方法。
一 实验原理
发酵生产中,部分产生菌不能直接利用淀粉。也基本上不能利用糊精作为碳源。因此,当淀粉作为原料时,必须现将淀粉水解成葡萄糖才能共发酵使用。在工业上将水解淀粉为葡萄糖的过程称为淀粉的“糖化”。可用来制备淀粉水解糖的原料很多,主要有山芋,玉米,小麦,等含淀粉的原料。水解淀粉为葡萄糖的方法有三种,即酸解法,酶解法,酶酸法及双酶法。本实验采用的是双酶法将淀粉水解成葡萄糖。首先利用的是α-淀粉酶将淀粉液化,转化为糊精及低聚糖,使淀粉可溶性增加;接着利用糖化酶将糊精及低聚糖进一步水解,转化为葡萄糖。
二 实验器材
1,实验材料
玉米粉 α—淀粉酶(2000u/g) 糖化酶(50000 u/g) 碘液(11g碘加22gkl,用蒸馏水定容至500ml)
2,仪器设备
恒温水浴槽 真空泵 抽滤纸及布氏漏斗 比色卡、
四实验方法:
淀粉在常温下不溶于水,但当水温至53℃以上时,淀粉的物理性能发生明显变化。淀粉在高温下溶胀、分裂形成均匀糊状溶液的特性,称为淀粉的糊化
淀粉糊化温度必须达到一定程度,不同淀粉的糊化温度不一样,同一种淀粉,颗粒大小不一样,糊化温度也不一样,颗粒大的先糊化,颗粒小的后糊化。
取50克淀粉置于400毫升烧杯中,加水200毫升,搅拌均匀,配成淀粉浆,用5% Na2CO3调节pH=6.2—6.3,加入1毫升5%CaCL2溶液,于90-95℃水浴上加热,并不断搅拌,淀粉浆由开始糊化直至完全成糊。加入液化型α---淀粉酶1克,不断搅拌使其液化,并使温度保持在70℃。然后将烧杯移至电炉加热到95℃至沸,灭活10分钟。过滤,滤液冷却到55℃,加入糖化酶1克,调节pH=4.5,于60-
大学网 65℃恒温水浴中糖化3-4小时,即为淀粉糖浆,若要浓浆,可进一步浓缩。三 操作步骤
50克淀粉置于400毫升烧杯中,加水100毫升,搅拌均匀,配成淀粉浆,用5% Na2CO3调节pH=6.2—6.3,加入1毫升5%CaCL2溶液,于90-95℃水浴上加热,并不断搅拌,淀粉浆由开始糊化直至完全成糊。加入液化型α---淀粉酶1克,不断搅拌使其液化,并使温度保持在70℃。然后将烧杯移至电炉加热到95℃至沸,
灭活10分钟。过滤,滤液冷却到55℃,加入糖化酶1克,调节pH=4.5,于60-65℃恒温水浴中糖化3-4小时,即为淀粉糖浆,若要浓浆,可进一步浓缩。
1,液化:称取50g玉米粉与烧杯中,加水至100ml,用纯碱调节PH到6.2-6.4,再加入适量的氯化钙。使钙离子浓度达到0.01mol╱L,并加入一定量的α-淀粉酶(控制5-8u╱g淀粉) ,搅拌均匀后加热至65℃,保温1.5h’左右,用碘液检验,达到所需的液化程度后升温到100℃,灭菌5-10min
2,碘液检验的方法:在洁净的比色卡上滴入1-2滴碘液,再滴待检的液化液,若反应液呈橙黄色或棕红色即液化完全。
3,糖化:将上述的液化液冷却至60℃,用10%柠檬酸调解PH至4.0-4.5按100u/g淀粉的量加入糖化酶,并于55-60%保温糖化至糖化完全。糖化结束后升温至100℃,灭酶5min。
4,糖化终点的判断:在150×15试管中加入10-15ml无水乙醇,加糖化液1-2滴,摇匀后若无白色沉淀形成表明已达到糖化终点。 5,过滤:将糖化液趁热用布氏漏斗进行抽滤即为水解糖液。
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