GST-hDSL重组蛋白的原核表达纯化及对人造血祖细胞的扩增作用

时间:2023-04-26 16:48:26 生物医学论文 我要投稿
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GST-hDSL重组蛋白的原核表达纯化及对人造血祖细胞的扩增作用

目的:原核表达DSL与谷胱甘肽S转移酶(GST)的融合蛋白并研究观察GST-hDSL对人脐带血CD34+造血祖细胞的体外扩增作用.方法:将人DSL cDNA的蛋白编码序列克隆入原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌DH5α中诱导表达融合蛋白,用DEAE阴离子交换柱纯化目的蛋白.然后分离、纯化脐带血CD34+造血祖细胞,不加细胞因子或加入SCF(干细胞生长因子,stem cell factor)和GM-CSF(粒-巨噬细胞集落刺激因子,granuloeyte-macrophage colony-stimulating factor),经过14天的培养,检测GST-hDSL对细胞总数、CD34+细胞百分率、以及集落形成的影响.结果:当SCF和GM-CSF存在时,GST-hDSL组的CD34+细胞百分率,集落(colony forming cells,CFC)数以及高增值潜能集落(high proliferative potential colony forming cells,HPP-CFC)数分别是时照组的1.9、1.2、5.3倍.结论:当与SCF和GM-CSF联合作用时,重组GST-hDSL蛋白对造血祖细胞具有扩增作用.

作 者: 林小娟 黄薇薇 赵梅 姜俊芬 郭凌晨 吴明媛 韩伟 LIN Xiao-Juan HUANG Wei-Wei ZHAO Mei JIANG Juan-Fen GUO Ling-Chen WU Ming-Yuan HAN Wei   作者单位:   刊 名: 现代生物医学进展  ISTIC 英文刊名: PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE  年,卷(期): 2008 8(4)  分类号: Q291  关键词: GST-hDSL   Notch通路   造血祖细胞  

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