HBx基因缺失型突变体QSG7701细胞转染模型的建立与鉴定

HBx基因缺失型突变体QSG7701细胞转染模型的建立与鉴定

目的 建立稳定表达乙型肝炎病毒X基因缺失型突变体HBx-d382和HBx-d431蛋白QSG7701肝细胞株.方法 HBxd382和HBx-d431基因经PCR和双酶切后,插入到真核表达载体pcDNA3中,构成重组质粒peDNA3/HBx-d382和pcDNA3/HBx-d431.应用基因转染的方法,将重组质粒分别转染到QSG7701肝细胞中,经G418筛选和RT-PCR、蛋白印迹鉴定,筛选出稳定表达HBx蛋白的细胞株.结果 经PCR、酶切及序列鉴定,重组质粒pcDNA3/HBx-d382和pcDNA3/HBx-d431构建成功.RT-PCR和Western blot结果湿示,该重组质粒能在QSG7701肝细胞中表达插入的HBx-d382和HBx-d431基因编码的融合蛋白.结论 成功建立了稳定表达羧基端截短的HBx蛋白肝细胞株HBx-d382和HBx-d431.HBx-d382和HBx-d431肝细胞模型的建立,为HBx-d382和HBx-d431基因及其蛋白的深入研究奠定了基础.

作 者： 朱平安 谭德明 陈莉 彭忠田 宋琳 ZHU Ping'an TAN Deming CHEN Li PENG Zhongtian SONG Lin   作者单位： 朱平安,ZHU Ping'an(深圳市第七人民医院检验科,广东,深圳,518081;中南大学湘雅医院传染科)

谭德明,陈莉,彭忠田,宋琳,TAN Deming,CHEN Li,PENG Zhongtian,SONG Lin(中南大学湘雅医院传染科) 

刊 名： 胃肠病学和肝病学杂志  ISTIC 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY  年，卷(期)： 2008 17(4)  分类号： Q343.1+3  关键词： 乙型肝炎病毒x基因   缺失型突变体   QSG7701细胞  

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