人类GAD67基因扩增及pEGFP-C2-GAD67真核表达载体的构建

人类GAD67基因扩增及pEGFP-C2-GAD67真核表达载体的构建

目的 扩增人类谷氨酸脱羧酶(GAD)67基因,并构建pEGFP-C2-GAD67真核表达载体.方法 应用基因重组技术,采用反转录PCR方法对来自人类脑组织cDNA中编码GAD67的基因片段进行扩增,插入PUC57克隆载体,经Xho Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切出GAD67基因片段,再克隆入真核表达载体pEGFP-C2后构建pEGFP-C2-GAD67重组载体,经PCR扩增、酶切后测序鉴定. 结果 人类GAD67基因扩增产物大小为1 785 bp,编码594个氨基酸残基.重组真核表达载体经酶切鉴定表明为正确重组子,PCR正确扩增出目的条带.与GenBank中人类GAD67基因序列比较,核苷酸和氨基酸水平的同源性分别达99.78%和99.66%. 结论 人类GAD67基因克隆后,可成功构建真核表达载体pEGFP-C2-GAD67,为进一步该基因转染神经干细胞移植治疗癫痫提供了实验基础.

作 者： 刘智良 马宏伟 姚志彬 徐如祥 张世忠 王娆 LIU Zhi-liang MA Hong-wei YAO Zhi-bin XU Ru-xiang ZHANG Shi-zhong WANG Rao   作者单位： 刘智良,姚志彬,LIU Zhi-liang,YAO Zhi-bin(510275,广州,中山大学基础医学院博士后流动站)

马宏伟,徐如祥,张世忠,王娆,MA Hong-wei,XU Ru-xiang,ZHANG Shi-zhong,WANG Rao(510282,广州,南方医科大学珠江医院神经外科) 

刊 名： 中华神经医学杂志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF NEUROMEDICINE  年，卷(期)： 2006 5(11)  分类号： Q3  关键词： 谷氨酸脱羧酶(GAD)67   克隆   真核表达质粒  

【人类GAD67基因扩增及pEGFP-C2-GAD67真核表达载体的构建】相关文章：

八年级美术上册《美术是人类文化的造型载体》教案10-17

共同构建人类命运共同体的方案范文（通用5篇）12-21

枣核 教案04-25

《枣核》教案05-24

基因分身药水作文11-17

活页教案：当堂达标教学的良好载体04-25

柚核的功效与作用11-08

橙子核的功效与作用12-22

核舟记教案04-28

《枣核》教学设计04-25