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牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测
通过基因组步移的方法扩增出一段924bp的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区序列,在线软件分析表明5'调控区内可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit-、RARE/TRE、AP4等转录因子结合位点.采用DNA重组的方法,将克隆得到的5'调控区片段插入启动子缺失的增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-1中,构建重组表达载体pEGFP-JFALP.重组载体瞬时转染COS-7细胞,在倒置荧光显微镜下可以检测到绿色荧光信号,且荧光信号随着时间的延长而增强.结果 表明本实验克隆的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区具有一定的启动子活性,为今后进一步研究碱性磷酸酶基因表达调控的分子机制奠定基础.
作 者： 施志仪 顾一峰 陈晓武 胡燕林 Shi Zhiyi Gu Yifeng Chen Xiaowu Hu Yanlin 作者单位： 上海水产大学生物技术研究中心,上海,200090 刊 名： 生物技术通报 PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年，卷(期)： 2008 ""(2) 分类号： Q95 关键词： 碱性磷酸酶 基因 5'调控区 克隆 功能【牙鲆碱性磷酸酶基因5调控区的克隆及其功能检测】相关文章：
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