葛仙米中SOD基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

葛仙米中SOD基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

采用PCR技术从葛仙米(Nostoc sphaeroides)总DNA中克隆了一段基因序列,该序列与基因库中已公布的编码普通念珠藻(Nostoc commnue)超氧化物歧化酶的氨基酸序列同源性为98%.将该基因插入含,T7启动子的质粒pET-32a(+)中构建表达质粒pET-sod,然后将该表达质粒转入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达,表达菌株用1mmol/L IPTG诱导表达数小时后,产生较多重组的蛋白,且该蛋白以可溶性蛋白形式存在.SDS-PAGE分析表明:在相对分子量约为22kd的位置有一条明显蛋白质带.将诱导表达后的蛋白通过亲和层析的方法进行蛋白纯化;NBT光还原法测定表达产物的比活力,每毫克纯化蛋白约为2550U.

作 者： 汪滢 章秀 吴双秀 王全喜 WANG Ying ZHANG Xiu WU Shuang-xiu WANG Quan-xi   作者单位： 上海师范大学生命与环境科学学院,上海,200234  刊 名： 上海师范大学学报（自然科学版）  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF SHANGHAI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES)  年，卷(期)： 2008 37(3)  分类号： Q785 Q949.22  关键词： 葛仙米   SOD基因克隆   诱导表达  

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