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HSV-1 UL30基因cDNA的克隆及筛选有效siRNA的融合载体构建
目的:克隆HSV-1 U130 cDNA并测序,构建pEGFP-N1-Fi融合表达载体,为靶向UL30基因的siRNA的设计和筛选奠定基础.方法:从感染HSV-1 F株的病变VERO细胞提取总RNA,二次PCR扩增出UL30 cDNA并克隆至pEGFP-N1质粒,测序鉴定序列;将UL30 cDNA 4个小片段亚克隆至pEGFP-N1形成pEGFP-N1-Fi融合表达质粒,转染VERO细胞,荧光显微镜观察融合蛋白表达情况.结果:成功克隆出UL30 cDNA,序列对比显示与基因库中的HSV-1 F株UL30序列同源性为99.4%;成功构建pEGFP-N1-Fi融合表达载体并实现Fi-EGFP融合蛋白的表达.结论:成功克隆出UL30 cDNA,成功构建pEGFP-N1-Fi融合表达载体,为靶向UL30基因的siRNA的设计和筛选奠定基础.
作 者： 何秋璟 张春龙 仁哲 张美英 朱钦昌 刘秋英 张佩琢 王一飞 HE Qiu-jing ZHANG Chun-long REN Zhe ZHANG Mei-ying ZHU Qin-chang LIU Qiu-ying ZHANG Pei-zhuo WANG Yi-fei 作者单位： 何秋璟,HE Qiu-jing(广东医学院,广东东莞,523808;暨南大学生物医药研究与开放基地,广东广州,510632)张春龙,ZHANG Chun-long(广东医学院衰老研究所,广东东莞,523808;暨南大学生物医药研究与开放基地,广东广州,510632)
仁哲,张美英,刘秋英,王一飞,REN Zhe,ZHANG Mei-ying,LIU Qiu-ying,WANG Yi-fei(暨南大学生物医药研究与开放基地,广东广州,510632)
朱钦昌,ZHU Qin-chang(中科院广州生物医药与健康研究所,广东广州,510663)
张佩琢,ZHANG Pei-zhuo(上海吉玛制药技术有限公司,上海,201203)
刊 名： 生物技术 PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2008 18(3) 分类号： Q782 关键词： UL30基因/单纯疱疹病毒1型 分子克隆 EGFP 融合表达载体【HSV-1 UL30基因cDNA的克隆及筛选有效siRNA的融合载体构建】相关文章：
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