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钙网蛋白-N58在毕赤酵母中的表达及活性分析
目的:利用毕赤酵母表达系统表达Calreticulin-N58蛋白.方法:利用重叠延伸PCR方法合成Calreticulin-N58基因,构建成分泌型的重组表达载体pPIC9K-CRT-N58.该重组表达载体经Sac I线性化后,电激转化人毕赤酵母GS115,经MD板和不同浓度G418筛选得到多拷贝重组菌株.经甲醇诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,在鸡胚中进行活性分析.结果:重组质粒pPIC9K-CRT-N58在毕赤酵母中经甲醇诱导能分泌表达CRT-N58蛋白,摇瓶表达量大约为60mg/L,纯化的目的蛋白有显著的血管生成抑制作用.结论:实验成功地在毕赤酵母表达系统中实现了Calreticulin-N58的分泌表达.为Calreticulin-N58蛋白的进一步药用研究奠定了基础.
作 者： 周细南 苏东晓 潘英文 张添元 张爱联 ZHOU Xi-nan SU Dong-xiao PAN Ying-wen ZHANG Tian-yuan ZHANG Ai-lian 作者单位： 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室,海南海口,571101 刊 名： 生物技术 PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2008 18(3) 分类号： Q786 关键词： calreticulin-N58 毕赤酵母 分泌表达 生物活性【钙网蛋白-N58在毕赤酵母中的表达及活性分析】相关文章：
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