新城疫病毒F和HN蛋白的原核表达

新城疫病毒F和HN蛋白的原核表达

目的:高水平表达新城疫病毒(Newcastle Disease Virus, NDV)标准强毒F48E8株的F基因和HN基因.方法:利用PCR方法扩增出新城疫病毒(Newcastle Disease Virus, NDV)标准强毒F48E8株的去掉N端信号肽和C端跨膜区的F基因和HN基因并将其克隆到原核表达载pET30a上,得到重组质粒rpET30a-NDV/F和rpET30a-NDV/HN,转化到受体菌Rosetta-gamiTM2感受态细胞中,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和Western blot检测.结果:表达的F蛋白大小约为40kD,HN蛋白大小约为51kD左右,符合预期结果.Western blot分析表明,能与抗His-tag单克隆抗体发生特异性反应.结论:重组蛋白在原核表达系统内得到了高水平的表达.说明了去除F和HN基因N端信号肽和C端跨膜区的必要性.

作 者： 冉旭华 闻晓波 赵喜红 刘长凤 RAN Xu-hua WEN Xiao-bo ZHAO Xi-hong LIU Chang-feng   作者单位： 黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆,163319  刊 名： 生物技术  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 18(3)  分类号： Q786  关键词： 新城疫病毒(NDV)   F蛋白   HN蛋白   原核表达  

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