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结合通用引物快速简便鉴定阳性克隆的PCR方法论文摘要
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摘要：通用引物与载体多克隆住点两端序列互补,将目的片段构建入栽体pGEM-T Easy中,利用载体通用引物M13F和M13R结合片段特异引物进行菌液PCR反应.用PCR产物电泳结果来筛选阳性克隆并鉴定目的片段插入方向,同时能有效对短插入片段重组子进行筛选与鉴定.最终以DNA测序结果来验证,与测序结果一致,显示通用引物PCR方法对阳性克隆的筛选和鉴定优于传统酶切和普通PCR鉴定方法,能够弥补传统方法的不足,且简便快速,可作为筛选和鉴定阳性克隆的有效手段.
作 者： 崔静 黄爱龙 张文露 Cui Jing Hung Ailong Zhang Wenlu
作者单位： 重庆医科大学病毒性肝炎研究所,感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆,400016
刊 名： 生物技术通报 PKU
英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN
年，卷(期)： 2008""(3)
分类号： Q78
关键词： 通用引物PCR 鉴定 插入方向 短插入片段
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