嗜铬颗粒蛋白A基因的反义转基因小鼠模型的建立及该基因启动子的组织特异性

嗜铬颗粒蛋白A基因的反义转基因小鼠模型的建立及该基因启动子的组织特异性

构建小鼠嗜铬颗粒蛋白A（Chromogranin A，CGA）基因的反义DNA载体pGAS1C-lacZ。用电穿孔的方法将该载体转化大鼠肾上腺髓质细胞瘤细胞系PC-12，X-Gal染色后证明位于CGA基因启动子下游的报告基因lacZ已经表达。用限制性内切酶除去载体的质粒骨架后，显微注射入供体昆明小鼠的受精卵中，随后将注射过DNA的受精卵移植入假母的输卵管中，完成正常的胚胎发育。用PCR的方法筛选假母产下的小鼠，得到CGA基因反义RNA转基因首建鼠14只。将首建鼠分别与正常昆明鼠交配，产生后代。取首建鼠的肾上腺进行X-Gal染色，组织用于石蜡切片，根据各鼠肾上腺切片的蓝色深浅判定转入基因表达量的高低，筛选到两只表达量高的首建鼠，留下它们的后代。取转基因鼠的各种组织用于X-Gal染色，发现报告基因在肾上腺、胰腺的胰岛中有表达，而在肌肉、脂肪组织中无表达，说明CGA基因的启动子具有神经内分泌组织特异性。

作 者： 孙紫清 吴鹤龄 SUN Zi-Qing WU He-Ling   作者单位： 北京大学生命科学学院,  刊 名： 遗传学报  ISTIC SCI PKU 英文刊名： ACTA CENETICA SINICA  年，卷(期)： 2001 28(5)  分类号： Q754  关键词： 嗜铬颗粒蛋白A基因   反义RNA  

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