用一个简单快速的RT-PCR技术筛选白细胞介素－6作用相关基因

用一个简单快速的RT-PCR技术筛选白细胞介素－6作用相关基因

为了研究白细胞介素-6(IL-6)作用相关基因以及一些可能受IL-6调控的基因，利用一个简单快速的以PCR为基础的方案，检测了IL-6处理和未处理的Sko007细胞中基因表达的差异，克隆并鉴定了差异表达基因的cDNA片段.首先用6-mer寡核苷酸引物进行反转录从而最大限度地将mRNA编码区序列生成cDNA；然后用2或3个较长的随机引物进行PCR扩增，并以不同引物组合重复PCR增扩；扩增产物在2%琼脂糖凝胶上电泳分离，回收差异片段并直接用于克隆、测序及进一步分析.在此研究中，获得了3个表达序列标签(EST)，其中一个为新的基因片段，反向RNA杂交有力证实了它们与IL-6作用的相关性.进一步的生物信息学分析表明，新基因片段STRF17在多种组织中表达.

作 者： 黄耀江 王关林 黎燕 施明 王建安 胡美茹 沈倍奋   作者单位： 黄耀江,王关林(大连理工大学生化工程研究所,)

黎燕,施明,王建安,胡美茹,沈倍奋(北京基础医学研究所,) 

刊 名： 生物化学与生物物理进展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2001 28(4)  分类号： Q939  关键词： 白细胞介素-6   差异表达基因   骨髓瘤细胞  

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