体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞的研究

体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞的研究

目的:探讨胰岛素样生长因子-I(IGF-I)和软骨细胞培养液体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向软骨细胞分化的可能性.方法:采用Percoll分离液分离培养人胚MSCs,体外扩增,用流式细胞仪测定MSCs的CD44、CD71、CD34、CD45表达;在第4代MSCs中加入的条件培养基进行诱导,根据条件培养基的不同分为4组:①IGF-I组:培养基中加入100ng/mLIGF-I;②软骨细胞培养液组:加入软骨细胞培养液;③联合诱导组:培养液中加入100 ng/mL IGF-I和软骨细胞培养液;④对照组:培养基中不加入IGF-I和软骨细胞培养液.采用倒置显微镜观察、Ⅱ型胶原免疫组化、细胞内蛋白多糖(PG)含量测定等方法判断诱导细胞的形态变化和表达软骨基质的能力.结果:体外培养的MSCs呈现成纤维细胞样形态,流式细胞仪检测结果显示,MSCs阳性表达CD44,阴性表达CD34,CD45;IGF-I和软骨细胞培养液联合诱导15d后,MSCs开始呈现软骨细胞的形态特点,Ⅱ型胶原免疫组化呈阳性,而未诱导的MSCs组呈阴性;联合诱导组细胞内PG含量为8.92μg/ml,显著高于IGF-I组、软骨细胞培养液组和对照组,但低于正常软骨细胞(P＜0.01).结论:IGF-I和软骨细胞培养液能诱导MSCs向软骨细胞分化.

作 者： 黄建荣 李建华 李卫平 沈慧勇 王志勇 宋卫东 刘尚礼 韩运   作者单位： 黄建荣,李卫平,沈慧勇,王志勇,宋卫东,刘尚礼,韩运(中山大学第二附属医院骨科,广州,510120)

李建华(广州医学院生理学教研室,广州,510182) 

刊 名： 中国临床解剖学杂志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ANATOMY  年，卷(期)： 2006 24(6)  分类号： Q343  关键词： 骨髓间充质干细胞   胰岛素样生长因子   软骨细胞  

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