嗜酸乳杆菌推定的β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的功能性表达

嗜酸乳杆菌推定的β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的功能性表达

目的 在大肠杆菌中诱导表达以嗜酸乳杆菌克隆β-半乳糖苷酶基因lacZ,为研究其酶学特性做准备.方法 从嗜酸乳杆菌ATCC 4356中克隆lacZ基因,并构建表达载体pET22b-lacZ-H、pQE31-H-lacZ和pQE31-lacZ,然后在大肠杆菌中诱导表达,并测定表达产物的β-半乳糖苷酶活性.结果 无标签的重组嗜酸乳杆菌β-半乳糖苷酶LacZ获得了功能性表达,表达量可达2.28 kU/L.而融合His-Tag的重组嗜酸乳杆菌LacZ却失去了β-半乳糖苷酶活性,即使复性也不能恢复.结论 克隆表达的成功为该酶的酶学性质研究和可能的应用打下了基础.

作 者： 潘渠 胡福泉 陈恬 邱岳 王广科 李晋川 PAN Qu HU Fu-quan CHEN Tian QIU Yue WANG Guang-ke LI Jin-chuan   作者单位： 潘渠,PAN Qu(成都医学院病原教研室,成都,610083;第三军医大学基础部微生物学教研室,重庆,400038)

胡福泉,HU Fu-quan(第三军医大学基础部微生物学教研室,重庆,400038)

陈恬,邱岳,王广科,李晋川,CHEN Tian,QIU Yue,WANG Guang-ke,LI Jin-chuan(成都医学院病原教研室,成都,610083) 

刊 名： 成都医学院学报  英文刊名： JOURNAL OF CHENGDU MEDICAL COLLEGE  年，卷(期)： 2009 4(2)  分类号： Q786  关键词： 嗜酸乳杆菌   β-半乳糖苷酶   克隆表达   His-Tag   复性  

【嗜酸乳杆菌推定的β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的功能性表达】相关文章：

枯草杆菌纳豆激酶基因在大肠杆菌中的优化高效表达04-26

pfl-act基因在大肠杆菌中的高效表达及其纯化04-29

嗜肺军团菌lvgA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达04-26

葛仙米中SOD基因的克隆及在大肠杆菌中的表达04-27

李属坏死环斑病毒CP基因在大肠杆菌中的表达及其抗血清制备04-27

抗菌肽Dermaseptin S4及其突变体基因在大肠杆菌中的表达04-26

大肠杆菌RNaseⅢ基因的克隆与表达04-26

溶藻弧菌asp基因在大肠杆菌中表达活性研究及条件优化04-27

Barnase在大肠杆菌中的分泌表达和诱导条件优化04-27

3-甾酮-1-脱氢酶基因在大肠杆菌中的表达及甾体转化研究04-27