来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达

来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达

柠檬酸杆菌(Citrobacter braakii)来源的植酸酶是目前报道的比活最高的植酸酶.按照毕赤酵母(Pichia pastoris)对密码子的选择偏向性,对来源于柠檬酸杆菌的高比活植酸酶基因AppA 进行了密码子优化改造.改造后的基因AppA(m)按正确的阅读框架融合到毕赤酵母表达载体pPIC9的α-因子信号肽编码序列3′端,通过电击转化得到重组转化子.通过PCR验证,AppA(m)已整合在酵母染色体上.SDS-PAGE分析和表达产物的研究表明,植酸酶得到了高效分泌表达,在5L发酵罐中植酸酶蛋白表达量达到3.2mg/mL发酵液,发酵效价达到每毫升发酵液1.4×107IU以上,高于目前报道的各种植酸酶基因工程菌株的发酵效价.

作 者： 黄火清 罗会颖 柏映国 王亚茹 姚斌 孟昆 袁铁铮 杨培龙   作者单位： 中国农业科学院饲料研究所,北京,100081  刊 名： 微生物学报  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA MICROBIOLOGICA SINICA  年，卷(期)： 2006 46(6)  分类号： Q78  关键词： 高比活植酸酶   基因改造   毕赤酵母   高效表达  

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