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猪β干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其对伪狂犬病毒的抑制作用
为了研制高活性的重组猪β干扰素,对PoIFN-β成熟蛋白第3、7和164位的3个氨基酸密码子进行毕赤酵母偏嗜性改造并构建了酵母表达载体pPICZαA-PIB.pPICZαA-PIB经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33.多株PCR鉴定为阳性的酵母转化子经甲醇诱导发酵分泌表达了PoIFN-β, 其中B1株酵母的PoIFN-β产量最高,约为2.5×105U/mL,其表达量约为60μg/mL,比活为4.17×106U/mg.将发酵上清液用PEG20000浓缩后进行SDS-PAGE和Western blot检测,结果表明表达产物是分子量约为28kDa和25kDa蛋白的混合物,两者均可与PoIFN-β阳性抗血清发生特异反应.表达产物比PoIFN-β理论推导分子量(约20.8kDa)大,推测可能是表达产物发生了不同程度的糖基化.重组PoIFN-β对伪狂犬病毒在细胞中增殖可呈现抑制作用,并且rPoIFN-β对伪狂犬病毒在MDBK细胞上早期增殖的抑制效果最为明显.
作 者： 曹瑞兵 周国栋 周海霞 包晶晶 陈溥言 CAO Rui-bing ZHOU Guo-dong ZHOU Hai-xia BAO Jing-jing CHEN Pu-yan 作者单位： 南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095 刊 名： 微生物学报 ISTIC PKU 英文刊名： ACTA MICROBIOLOGICA SINICA 年，卷(期)： 2006 46(3) 分类号： Q78 关键词： 猪β干扰素 毕赤酵母 分泌表达 伪狂犬病毒 抗病毒【猪β干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其对伪狂犬病毒的抑制作用】相关文章：
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