抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的活性研究

抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的活性研究

目的: 构建并表达抗人精浆蛋白/抗CD3的双特异性单链抗体(BsscFv),并检测其生物学活性.方法: 利用重叠延伸拼接PCR,拼接抗人精浆蛋白scFv基因和抗CD3 scFv基因,并在中间引入柔性短肽(GlySerGly)2,构建抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv基因.测序正确后,将融合基因亚克隆入真核表达载体中,并在HeLa细胞中进行表达,采用流式细胞术(FCM)和 51Cr释放试验,评价BsscFv的抗原结合活性和体外介导的特异性杀伤靶细胞的效应,以及利用裸鼠前列腺癌模型观察其在体内的抑瘤作用.结果: 测序分析证实,BsscFv基因片段的大小为1.5 kb,编码500个氨基酸,该序列与设计的完全一致.SDS-PAGE和Western blot分析证明: 表达产物存在于HeLa细胞的培养上清中,其相对分子质量(Mr)为61 000.FCM结果显示: BsscFv可特异性的结合前列腺癌细胞LNCaP和CD3+淋巴瘤细胞Jurkat,结合率分别为54.1%和53.7%.体外实验表明,BsscFv可介导CTL对LNCaP细胞的杀伤.与对照组相比较,接种LNCaP的裸鼠在体内注射激活的CTL和BsscFv治疗后,肿瘤的生长明显受到抑制(P<0.05).结论: 抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv具有一定的生物学活性,在体内、体外均可介导CTL杀伤靶细胞LNCaP.

作 者： 王栋 王禾 武国军 吴卫真 杨顺良 林文洪 谭建明 WANG Dong WANG He WU Guo-jun WU Wei-zhen YANG Shun-liang LIN Wen-hong TAN Jian-ming   作者单位： 王栋,吴卫真,杨顺良,林文洪,谭建明,WANG Dong,WU Wei-zhen,YANG Shun-liang,LIN Wen-hong,TAN Jian-ming(南京军区福州总医院泌尿外科,福建,福州,350025)

王禾,武国军,WANG He,WU Guo-jun(第四军医大学西京医院泌尿外科,陕西,西安,710032) 

刊 名： 细胞与分子免疫学杂志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(4)  分类号： Q789  关键词： 前列腺肿瘤   CD3   单链抗体   双特异性抗体  

【抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的活性研究】相关文章：

抗转铁蛋白受体单链抗体的表达、纯化及活性测定04-26

抗CD3/抗CD20双特异性单链抗体介导的B淋巴瘤细胞体外裂解作用04-26

抗果蝇Trio蛋白抗体的制备及鉴定04-26

家蚕丝素轻链蛋白多克隆抗体的制备及应用04-26

化学诱抗剂诱导金银花抗白粉病效果研究04-27

抗镉细菌的筛选鉴定及其抗性研究04-26

茄子品种抗黄萎病性鉴定方法研究04-27

粪肠球菌Ace重组蛋白的表达、纯化及黏附活性研究04-27

抗衾解释08-11

抗疫的简报05-17