外周血内皮祖细胞体外培养分化研究

外周血内皮祖细胞体外培养分化研究

目的从人外周血中分离、培养和鉴定内皮祖细胞(EPCs),并观察其在体外增殖分化过程中各种细胞表型的变化.方法采用密度梯度离心方法获得外周血单个核细胞,体外进行诱导、分化和扩增,于培养第7天选择免疫荧光(DiI-acLDL/ FITC-UEA-Ⅰ)鉴定EPCs,并且用流式细胞仪和RT-PCR方法观察上述细胞在第0、4、10和21天的CD34、CD31、KDR和eNOS的表达变化.结果外周血单个核细胞在培养过程中出现梭形贴壁和铺路石样等形态;第7天免疫荧光染色表明,约70%的细胞呈双荧光阳性;流式细胞仪分析显示,CD31和KDR表达在体外培养过程中逐渐升高,至第21天分别达到(72.1±11.2)%和(81.0±12.5)%,而CD34在第10天达到高峰(38.0±13.4)%后,第21天下降为(28.3%±12.2)%;RT-PCR结果表明,第4、10和21天eNOS的表达逐渐增强.结论本试验成功从外周血单个核细胞中分离培养出EPCs,在其体外扩增分化为成熟内皮细胞的过程中,CD31、KDR和eNOS等内皮细胞标志表达逐渐增强,而CD34的表达在内皮祖细胞的成熟分化过程中略有下降.

作 者： 顾俊 王长谦 范华骅 聂晓绚 何奔 王彬尧 黄定九 GU Jun WANG Chang-qian FAN Hua-hua Nie Xiao-xuan HE Ben WANG Bin-yao Huang Ding-jiu   作者单位： 顾俊,王长谦,何奔,王彬尧,黄定九,GU Jun,WANG Chang-qian,HE Ben,WANG Bin-yao,Huang Ding-jiu(上海交通大学医学院仁济医院心内科,上海,200001)

范华骅,聂晓绚,FAN Hua-hua,Nie Xiao-xuan(上海血液中心血液工程研究室) 

刊 名： 上海交通大学学报（医学版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)  年，卷(期)： 2006 26(3)  分类号： Q813.1 Q254  关键词： 内皮祖细胞   内皮细胞   血管新生  

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