Candida rugosa脂肪酶同工酶的分离及选择固定化

Candida rugosa脂肪酶同工酶的分离及选择固定化

采用"界面亲和层析",从商品Candida rugosa脂肪酶(CRL)中分离到三个同工酶(CRL-1、CRL-2和CRL-3),它们在水-有机溶剂双液相体系中催化(R,S)-萘普生甲酯的不对称水解反应,具有不同的立体选择性.分析表明:CRL-1和CRL-2上不同程度地非共价结合有小分子的酸性化合物,阻碍了其活性位点处疏水腔的完全开放;CRL-3上不含有该小分子酸性化合物,活性位点处疏水腔可处于完全开放构象.据此分别将CRL同工酶选择性地固定在不同的载体(GDX101和YWG-NH2)上.通过简单易行的选择吸附步骤,可同时达到同工酶的分离及固定化目的,提出了一种对结构上相差不大同工酶分离的便利方法.

作 者： 辛嘉英 徐毅 李树本 王来来 XIN Jia-Ying XU Yi LI Shu-Ben WANG Lai-Lai   作者单位： 中国科学院兰州化学物理研究所,羰基合成与选择氧化国家重点实验室,兰州,730000  刊 名： 生物化学与生物物理进展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2000 27(5)  分类号： Q556  关键词： CRL同工酶   分离   界面亲和层析   选择性固定化  

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