噬菌体展示技术筛选DNA错配修复蛋白MutS高亲和性抗体

噬菌体展示技术筛选DNA错配修复蛋白MutS高亲和性抗体

目的制备MutS的高亲和抗体,以有利于MutS的检测及应用.方法利用IPTG的诱导作用,在E.coli中诱导表达目标蛋白MutS.利用亲和层析方法获得目标蛋白,并利用凝胶阻滞实验分析其活性.将MutS作为抗原,在Tomlinson抗体库中利用噬菌体展示技术来筛选MutS的高亲和力噬菌粒.将其转化到大肠杆菌后,诱导表达并通过亲和层析的方法来获得可溶性的抗体片段,并检测其亲和力.结果纯化后的MutS具有识别、结合错配DNA双链的活性.ELISA分析表明,利用噬菌体展示技术可获得MutS高亲和力的噬菌粒.将其转化到大肠杆菌HB2151后,诱导表达并纯化到抗体片段,其亲和力为0.9×108 L/mol.结论利用噬菌体展示技术筛选到MutS高亲和力的抗体.

作 者： 刘俊 全智勇 刘建华 LIU Jun QUAN Zhi-yong LIU Jian-hua   作者单位： 上海交通大学生命科学与技术学院,上海,200240  刊 名： 复旦学报（医学版）  ISTIC PKU 英文刊名： FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES  年，卷(期)： 2006 33(4)  分类号： Q81  关键词： 噬菌体展示   DNA错配修复蛋白MutS   可溶性抗体片段  

【噬菌体展示技术筛选DNA错配修复蛋白MutS高亲和性抗体】相关文章：

噬菌体改组库的构建及高活性水蛭素变异体的筛选04-26

抗果蝇Trio蛋白抗体的制备及鉴定04-26

甲醛所致DNA-蛋白质交联修复的研究04-27

帕金森病相关蛋白α-共核蛋白的可溶性表达、纯化及抗体制备04-26

家蚕丝素轻链蛋白多克隆抗体的制备及应用04-26

高载锌量真菌吸附菌株的筛选04-25

强化定期检测对高排放车的筛选功能04-26

抗体分离纯化技术的研究进展04-27

具几丁质酶抑制活性的中性蛋白酶的筛选与纯化04-26

抗转铁蛋白受体单链抗体的表达、纯化及活性测定04-26