人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测

人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测

目的:获得大量重组人α防御素(HDα)并检测其活性,为其深入研究提供必要的材料.方法:体外化学合成得到带有羟氨裂解位点编码序列的HDα基因片段,克隆入pBV220-IL-4表达载体构建重组表达载体pBV220-IL-4- HDα.测序正确后将重组质粒转入大肠杆菌DH5α中进行温度诱导表达.经羟氨裂解去除IL-4后,对所得蛋白进行纯化、复性,以SDS-PAGE和生物学活性检测鉴定其特性.结果:经温度诱导后,融合蛋白主要以包涵体的形式表达,表达产物约占菌体总蛋白的20%;羟氨裂解切除IL-4后,所得目的蛋白的纯度约为99.8%.抑菌活性试验和克隆形成试验显示,所得HDα对细菌生长有明显的抑制作用.结论:成功地构建了HDα基因的重组表达质粒,获得稳定表达的工程菌,并建立了复性与纯化技术,为进一步对其进行功能研究与应用奠定了基础.

作 者： 傅海燕 张剑 路凡 蒲勤 王孝功 卢兹凡 徐俊卿 赵忠良 FU Hai-yan ZHANG Jian LU Fan PU Qin WANG Xiao-gong LU Zi-fan XU Jun-qing ZHAO Zhong-liang   作者单位： 傅海燕,张剑,路凡,蒲勤,王孝功,卢兹凡,赵忠良,FU Hai-yan,ZHANG Jian,LU Fan,PU Qin,WANG Xiao-gong,LU Zi-fan,ZHAO Zhong-liang(第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710032)

徐俊卿,XU Jun-qing(第四军医大学西京医院放射科,陕西,西安,710032) 

刊 名： 细胞与分子免疫学杂志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(2)  分类号： Q786  关键词： 人α防御素(HDα)   表达   纯化   生物学活性   检测  

【人α防御素融合表达、纯化及生物活性检测】相关文章：

GST-talin1融合蛋白的原核表达及纯化04-27

人EPO-Linker-EGFP融合蛋白的设计和生物活性预测04-27

粪肠球菌Ace重组蛋白的表达、纯化及黏附活性研究04-27

血管生成素在COS-7细胞中的表达及其生物活性研究04-27

抗转铁蛋白受体单链抗体的表达、纯化及活性测定04-26

TBa过敏原表位区段的融合表达及免疫活性分析04-26

人源胸腺素α原和白介素2融合蛋白的基因克隆与原核表达04-27

人源血管内皮生长因子突变体的克隆、分离纯化及活性研究04-26

抗菌抗癌肽CM4N在大肠杆菌中的融合表达与活性鉴定04-27

动物源防御素的功能研究进展04-26