转拟南芥AtKup1基因高含钾量烟草获得

转拟南芥AtKup1基因高含钾量烟草获得

提取拟南芥幼根总RNA,进行RT-PCR逆转录,产物测序,将其构建到含Km(带内含子)筛选标记的植物双元表达载体上,根癌农杆菌介导法将AtKup1基因导入烟草,对转化子进行PCR扩增、GUS染色、Southern杂交和AtKup1基因mRNA荧光定量PCR分析,并进行烟叶内在成分化验分析.PCR获得2100bp左右扩增产物,测序结果证实扩增产物序列与拟南芥AtKup1基因(Genbank No:AF029876)一致;得到GUS染色阳性的AtKup1基因转化烟草材料29株.经PCR扩增、分子杂交检测证实AtKup1基因已整合到转基因烟草的基因组,荧光定量PCR分析可以在幼根中检测到AtKup1基因的mRNA转录.烟叶含钾量化验结果表明导入的AtKup1基因在转化材料中成功表达,使烟叶含钾量提高约45%.

作 者： 郭兆奎 杨谦 姚泉洪 万秀清 颜培强 GUO Zhao-kui YANG Qian YAO Quan-hong WAN Xiu-qing YAN Pei-qiang   作者单位： 郭兆奎,杨谦,GUO Zhao-kui,YANG Qian(哈尔滨工业大学生命科学与工程系,哈尔滨,150001)

姚泉洪,YAO Quan-hong(上海市农业科学院生物技术中心,上海,201106)

万秀清,颜培强,WAN Xiu-qing,YAN Pei-qiang(黑龙江省烟草科学研究所,牡丹江,157011) 

刊 名： 中国生物工程杂志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2005 25(12)  分类号： Q81  关键词： AtKup1基因   转基因烟草   K+含量  

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