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抑制差减杂交法克隆牙鲆变态早期差异表达的基因
为了克隆变态早期牙鲆头部差异表达的基因,采用抑制差减杂交法,以变态前的仔鱼头部表达的RNA作为驱动RNA,建立了牙鲆变态早期的差减cDNA文库,并利用相对定量RT-PCR对其进行了筛选.差减库的平均插入片段558 bp左右,阳性率为81.8%.随机测定的45个克隆,在剔除假阳性克隆后,共得到22个不同的基因,其中13个为已知cDNA的同源基因,而另外9个为已知蛋白的同源基因,分别为prolactin receptor-like,COL1A1,M3-muscarinic receptor,Sfrs3,tropomyosin,ribosomal protein L27,ribosomal protein S12,GAPDH,COL1A3.在所有22个基因中,COL1A1基因在差减库中的分布频率最高,为22.2%.RT-PCR检测结果表明,在所检测的11个基因中,所有基因在右眼移动前后的牙鲆头部均有表达,只是体现在表达水平上的不同.
作 者： 鲍宝龙 杨桂梅 施志仪 任大明 BAO Bao-long YANG Gui-mei SHI Zhi-yi REN Da-ming 作者单位： 鲍宝龙,BAO Bao-long(上海水产大学生命科学与技术学院,上海,200090;复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海,200433)杨桂梅,施志仪,YANG Gui-mei,SHI Zhi-yi(上海水产大学生命科学与技术学院,上海,200090)
任大明,REN Da-ming(复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海,200433)
刊 名： 水产学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA 年，卷(期)： 2006 30(2) 分类号： Q344+.13 S917 关键词： 抑制差减杂交 牙鲆 变态早期 变态前 差异表达 相对定量RT-PCR【抑制差减杂交法克隆牙鲆变态早期差异表达的基因】相关文章：
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