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HBcAg和HBsAg前S1表位肽融合蛋白的表达研究
构建、表达并纯化了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白BTcs1,为开发新型HBV治疗和预防性疫苗提供实验依据.利用DNA重组技术,构建了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表达质粒pBTcs1,在大肠杆菌(HB101)中进行表达,用蔗糖密度梯度超速离心对表达产物BTcs1进行纯化,用SDS-PAGE、SEC、Western-blot和电镜进行鉴定.结果表明成功构建了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表达质粒pBTcs1,BTcs1的表达量为20~25mg/L,DOT-BLOT结果显示BTcs1主要分布在30%~50%蔗糖介质中,SDS-PAGE和SEC结果显示蛋白纯度>95%,Western-blot结果显示BTcs1可以与抗HBcAg抗体和抗HBsAg前S1抗体特异杂交,显色条带在约28kDa处,电镜分析表明BTcs1可以自主组装成病毒样颗粒(VLP),直径约为30~34nm.为进一步探讨BTcs1的功能及应用奠定了基础.
作 者: 孙红光 闫东梅 杜柏榕 朱迅 SUN Hong-guang YAN Dong-mei DU Bai-rong ZHU Xun 作者单位: 吉林大学基础医学院免疫学教研室,长春,130021 刊 名: 中国生物工程杂志 ISTIC PKU 英文刊名: CHINA BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2006 26(3) 分类号: Q81 关键词: 乙肝病毒核心抗原(HBcAg) 前S1表位 融合蛋白 表达【HBcAg和HBsAg前S1表位肽融合蛋白的表达研究】相关文章:
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