葡萄病毒B的RT-PCR检测技术研究

葡萄病毒B的RT-PCR检测技术研究

旨在建立适合葡萄的葡萄病毒B的RT-PCR检测技术.从感染葡萄病毒B的葡萄皮层中提取总RNA,以其为模板合成cDNA第一链,并利用两对引物分别进行PCR扩增;回收PCR特异扩增产物,与pUCm-T载体连接,并进行转化、重组克隆的筛选、重组质粒的酶切鉴定和序列测定.结果显示,两对引物均能获得与预期片段大小一致长约460 bp和470 bp的扩增产物扩增片段序列与已报道GVB序列(序列号:X75448)的核苷酸同源性均为81%,经反复多次试验证实,利用总RNA为模板合成cDNA并进行PCR扩增检测GVB是准确、可靠的.

作 者： 杨相昆 田海燕 牛建新 王林 代永欣   作者单位： 杨相昆(石河子大学农学院园艺系,石河子,832003;新疆兵团绿洲生态农业重点实验室,石河子,832003;新疆农垦科学院,石河子,832003)

田海燕(新疆兵团绿洲生态农业重点实验室,石河子,832003;新疆农垦科学院,石河子,832003)

牛建新,王林,代永欣(石河子大学农学院园艺系,石河子,832003;新疆兵团绿洲生态农业重点实验室,石河子,832003) 

刊 名： 生物技术通报  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2010 ""(5)  分类号：   关键词： 葡萄病毒B   检测   重组质粒   序列   同源性  

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