快速微量提取番茄DNA及SSR-PCR反应体系的优化

快速微量提取番茄DNA及SSR-PCR反应体系的优化

以番茄叶片为试材,采用改进的CTAB法,电钻研磨,提取过程中加入醋酸铜,设计4因素3水平的正交试验对PCR反应体系进行优化,同时利用梯度PCR对退火温度进行选择选择.结果表明:优化的10μL反应体系含:1 × buffer,1.2 mmol/L Mg2+,1.5 mmol/L dNTPs,1.2 μmol/L引物,0.75 U Taq DNA聚合酶,10 ng模板DNA.扩增程序为:94℃预变性2 min;94℃变性30 s,49.2℃退火30 s,68℃延伸30 s,共35个循环;最后72℃延伸8 min.优化的反应体系可以用于SSR分子标记机的研究,在所有SSR引物中基本都能有效扩增;改进的CTAB法提取的DNA纯度更高.

作 者： 贾俊忠 田丽萍 位江静 张超 魏亦农 吴晓刚 薛林   作者单位： 贾俊忠,位江静,张超,魏亦农,吴晓刚(石河子大学,生命科学学院,新疆,石河子,832000)

田丽萍(石河子大学,药学院,新疆,石河子,832000)

薛林(新疆石河子蔬菜研究所) 

刊 名： 北方园艺  PKU 英文刊名： NORTHERN HORTICULTURE  年，卷(期)： 2010 ""(8)  分类号： S641.203.6  关键词： 番茄   DNA微量提取   PCR反应体系优化   分子标记  

【快速微量提取番茄DNA及SSR-PCR反应体系的优化】相关文章：

红曲菌基因组DNA提取及RAPD反应体系优化04-26

菠萝DNA的提取及AFLP反应体系的建立04-27

荔枝DNA提取及RAPD扩增条件优化04-26

丹参SRAP反应体系的建立与优化04-26

白鲫鱼C-反应蛋白提取条件的优化04-25

dna粗提取与鉴定06-27

枸杞线粒体DNA的提取04-26

DNA的提取与鉴定实验报告09-06

快速克隆DNA大片段的方法04-26

基于棉花BAC文库的线粒体DNA的提取方法04-26