嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆与检测

嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆与检测

根据已发表的人源嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)温敏胞外蛋白酶基因eprA1的核甘酸序列,设计合成一对引物,以嗜水气单胞菌鱼源株Ah J-1基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到1 005 bp的胞外蛋白酶基因eprJ1,将该基因片段连接到pMD18-T载体中,构建克隆载体pMD-eprJ1.序列分析发现,其与发表的Ah AH1的胞外蛋白酶eprA1基因的同源性有91%.根据测序结果在保守区重新设计一对引物以增强特异性,扩增片段大小为387 bp.对1990～2004年15年间从浙江、福建、湖北及江苏等地不同患病水产动物肝肾等脏器分离到的23株Ah检测结果显示,从中国东南地区分离的21株Ah水生动物致病性菌株扩增均为阳性,2株Ah非致病性菌株为阴性,推测该基因普遍存在于致病性Ah中.检测模板DNA的灵敏度可达1.5×10-3 ng/μL.

作 者： 任燕 陆承平 姚火春 REN Yan LU Cheng-ping YAO Huo-chun   作者单位： 任燕,REN Yan(中国水产科学研究院珠江水产研究所鱼病中心,广州,510380)

陆承平,姚火春,LU Cheng-ping,YAO Huo-chun(南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏,南京,210095) 

刊 名： 中国水产科学  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FISHERY SCIENCES OF CHINA  年，卷(期)： 2006 13(6)  分类号： S94  关键词： 嗜水气单胞菌   温敏胞外蛋白酶基因   克隆与检测  

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