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NtSKP1基因的反义载体构建及转基因烟草的产生
根据枯斑三生烟SKP1基因(NtSKP1)的序列,设计一对分别含有特定酶切位点的特异引物,以重组质粒pMD18-SKP1为模板,扩增目的基因(约473 bp)片段.将反向目的片段插入中间载体pHANNIBAL的内含子右侧,再经NotⅠ酶切回收约3 443 bp的目的片段,插入到双元载体质粒pART27中,成功构建了含NtSKP1基因片段反向序列的植物表达载体pART27-skp1a,其转录产物能减弱目的基因的表达.将pART27-skp1a 质粒导人根癌农杆菌LBA4404中并转化烟草叶片细胞,经选择分化培养,获得转基因烟草.
作 者: 张付云 李伟 张瑛 孙秋颖 李研 杜昱光 作者单位: 张付云,李伟,张瑛,孙秋颖,李研(大连水产学院,大连,116023)杜昱光(中国科学院大连化学物理研究所,辽宁省碳水化合物研究重点实验室,大连,116023)
刊 名: 生物技术通报 PKU 英文刊名: BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年,卷(期): 2010 ""(4) 分类号: 关键词: NtSKP1基因 反义表达载体的构建 转基因烟草 NtSKP1 gene Construction of antisense expression vector Transgenic tobacco【NtSKP1基因的反义载体构建及转基因烟草的产生】相关文章:
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