多通道抗凝血药物筛选检测仪的研制

多通道抗凝血药物筛选检测仪的研制

 摘要：介绍一种以透射比浊法为设计原理，单片机89C52为核心的96通道高速抗凝血药物筛选平台。该仪器自动完成血液（血浆）凝血时间的实时检测及数据采集，数据采集的精度、速度及灵敏度较传统的凝血时间测量仪器有较大的提高。提出了将凝血时间测量用于相关药物筛选的新途径。

    关键词：检测仪 单片机 凝血时间 药物筛选

血液凝固的过程非常复杂的。生物体在正常生理状态下，血液中的凝血系统与抗凝血系统处于自我调节的一种平衡状态，如果这种平衡被破坏，就会形成凝血系统疾病。现在临床上最常用的抗凝血类药物是肝素，这种药物虽然有很好的抗凝血效果，却伴随着血和血小板减少等副作用，而且当患者本身患有弥散性血管内凝血等疾病时便无法采用。现有的口服类抗凝血药物（如节丙酮香豆素[1]）的使用效果又不甚理想。因此，新型抗凝血药物的研制工作是非常必要的。

进行抗凝血药物开发的第一步就是要检验药物的抗凝效果，也就是凝血时间的检测。现在际上普通认可的测量凝血时间的指标主要有两个：凝血酶原时间（Prothrombin Time,PT）和活化部分凝血活酶时间（Actived Partial Thromboplastin Time,APTT）。这两个指标是由国际血液学标准化委员会（ICSH）、估计血检与止血委员会（ICTH）和美国临床检验标准委员会（NCCLS）联合制定分布的[2]。PT和APTT不仅能取代传统的Duke法出血时间和玻片法凝血时间而作为新的临床止血功能指标，并且能为抗凝血药物开发过程提供更好的监控指标。

正常的凝血过程时间很短，即使加入抗凝剂，也不会超过1分钟。正常情况下，PT不会超过20秒，这给手工测量带来了很大的困难。为了寻求方便的检测途径，国内外许多企业已经开始研制相关的自动化凝血时间测量仪，并且已经投放市场如德国TECO公司的TEChrom IV plus 4通道半自动血栓/止血测定仪；法国BIOCHEM公司STAGO全自动血栓/止血分析仪等。这些凝血测量仪虽然可以完成一个或几个样品的同时检测，但是仍然沿用临床检测的套路，检测速度有限，样品用量比较大，样品波大都固定于仪器上，清洗不方便，同时价格也相当昂贵，不适用于药物开发。

为了提高凝血测量仪的性能，同时满足高通量的药物筛选的需求，我们利用单片机设计了一套新型的凝血时间自动检测仪，目的在于为新药开发质量控制提供便利。这台小型的凝血时间测量装置（体积仅30cm×20cm×12cm）不仅能够进行96路并行实时检测，而且样品用量少（20μl），灵敏度高（0.1秒），具有很好的应用前景。

1 测量原理

血液的凝固从物理上来讲就是非溶性纤维蛋白形成的过程，而且在很短的时间内非溶性纤维蛋白的数量会陡然增加。这样，整个血液的透光率就会迅速降低（浊度升高），一段时间后就会渐渐变缓。通常我们所测量的凝血时间也就是指非溶性纤维蛋白形成的起始阶段，即浊度变化达到三倍信澡比的时间。

透射比浊法正是利用了血液在凝血过程中浊度突然升高的原理来设计的。只要检测器件具有足够的灵敏度，就可以检测出血液凝固的时间。

[1] [2] [3] [4] 

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