实验实施方案

时间:2024-09-04 09:39:47 方案 我要投稿

实验实施方案

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实验实施方案

  药品:

  半枝莲、95%乙醇、盐酸小檗碱对照品、蒸馏水、盐酸溶液、氢氧化钠溶液、碘-碘化钾试剂

  仪器:

  722型紫外分光光度计、电子分析天平、电热恒温水浴锅、数据超声波清洗器、微型植物粉碎机、PH计、加热板、循环水式多用真空泵

  实验方法:

  超生波提取法、半仿生法、正交实验、生物碱的鉴定方法

  实验步骤:

  一、药品、仪器的准备

  二、对照品溶液的制备、波长的测定、标准曲线的制作、推算出回归方程

  三、样液的制备

  四、用半仿生法提取半枝莲中生物碱

  1、单因素实验

  (1)温度对提取效果的影响

  (2)酸度对提取效果的影响

  (3)碱度对提取效果的影响

  (4)料液比对提取效果的影响

  2、因素、水平的确定及进行正交实验设计:

  由单因素温度、酸度、碱度和料液比作为正交试验的四个水平

  进行正交实验以确定半仿生法中最优的提取条件

  五、超声波辅助半仿生法提取半枝莲生物碱:在上述半仿生法得到的最优提取条件下进行超声波提取

  1、单因素实验

  (1)温度对提取效果的影响

  (2)提取次数对提取效果的影响

  (3)酒精浓度对提取效果的影响

  2、因素、水平的确定及进行正交实验设计:

  由单因素温度、提取次数、酒精浓度作为正交试验的三个水平进行正交实验以确定在超声波辅助半仿生法提取中的最优条件

  六、在超声波辅助半仿生法提取的最优条件下提取半枝莲中生物碱

  七、利用紫外分光光度计测定上述提取到的生物碱的吸光度,与标准曲线进行比较,计算出生物碱的量及产率。

  八、生物碱的鉴定:

  生物碱沉淀反应

  1、碘化铋钾试剂反应 取渗漉液1ml,加碘化铋钾试剂1滴~2滴,生成棕色至棕红色者为阳性反应在。

  2、碘-碘化钾试剂反应 取渗漉液1ml,加碘-碘化钾试剂1滴~2滴,生成棕黄色沉淀者为阳性反应。

  3、硅钨酸试剂反应 取渗漉液1ml,加硅钨酸试剂数滴,生成淡黄色沉淀者为阳性反应。

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